正就讀中學的少年邁爾斯（沙梅克·摩爾 Shameik Moore 配音）意外被一隻遭受放射性汙染的蜘蛛咬傷隨後身體發生奇特的變化偶然機緣他目睹了蜘蛛俠（克裏斯·派恩 Chris Pine 配音）和犯罪頭目金並（列維·施瑞博爾 Liev Schreiber 配音）的戰鬥為了阻止金並利用時空對撞機擾亂宇宙蜘蛛俠最終壯烈犧牲可未過多久來自平行宇宙的頹廢的彼德·帕克（傑克·約翰遜 Jake M. Johnson 配音）出現在邁爾斯麵前為了阻止金並的陰謀並幫助這個帕克返回自己的宇宙他們闖入金並的老巢在這一過程中二人遭到章魚博士和徘徊者的狙擊與此同時來自其他宇宙的女蜘蛛俠、暗影蜘蛛俠、蜘豬俠、二次元蜘蛛妹相繼出現 　　他們合力與惡勢力展開鬥爭……